摘要目的:检测食管鳞癌组织中细胞周期素D1(CyclinD1)、细胞周期素B1(CyclinB1)的表达,并探讨其临床病理学意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测73例食管鳞癌组织、27例癌旁正常黏膜组织中CyclinD1、CyclinB1的表达,分析其阳性表达与食管鳞癌患者临床病理因素的关系。结果:食管鳞癌组织中CyclinD1、CyclinB1蛋白阳性表达率高于正常食管黏膜组织,差异都有统计学意义。食管鳞癌组织中CyclinD1、CyclinB1蛋白阳性表达与淋巴结转移、病理分级和浸润深度有关(P均<0.05)。结论:CyclinD1、CyclinB1的异常表达与食管鳞癌的发生、发展密切相关,可能是影响食管鳞癌预后的重要分子学指标。
关键词食管鳞癌CyclinD1CyclinB1免疫组织化学
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.11.170
资料与方法
2007年1月～2009年1月在我院手术切除且经病理证实的食管鳞癌及配对癌旁正常食管黏膜组织标本73例,男48例,女25例,年龄44～82岁。所有病例术前均未化疗或放疗。标本均经10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,连续切片,厚4μm,分别用HE和免疫组化染色。
结果判定:每张切片随机观察10个高倍视野,每个视野计数200个细胞,以胞核中出现棕黄色颗粒为阳性细胞,阳性细胞数≤10%总细胞数判为阴性,阳性细胞>10%判为阳性。
统计学处理:采用SPSS14.0进行统计分析,采用X2检验。
结果
食管鳞癌组织标本中,Cyclin D1蛋白阳性表达率61.6%(45/73),正常食管黏膜组织中,阳性表达率14.8%(4/27),两者间有统计学有差异(P<0.01);Cyclin B1蛋白在食管鳞癌组织标本中阳性表达率69.8%(51/73),在正常食管黏膜组织中阳性表达率3.7%(1/27),有统计学差异(P<0.01),见表1。
Cyclin D1、Cyclin B1的阳性表达与组织学分级、浸润深度、淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。高分化鳞癌细胞(Ⅰ级)Cyclin D1阳性表达率为40.0%,明显低于低分化细胞(Ⅲ级)的90.1%;Cyclin B1在高分化鳞癌细胞(Ⅰ级)阳性表达率为33.3%,也明显低于低分化细胞(Ⅲ级)的95.5%,均有统计学差异(P<0.01)。有淋巴结转移的Cyclin D1、Cyclin B1阳性表达率分别为70.3%和77.8%,均高于无淋巴结转移的36.8%和47.4%,统计学差异(P<0.01)。
讨论
食管癌是一种很常见的恶性肿瘤,我院处在食管癌的高发区。肿瘤的发生与发展是多基因、多步骤异常改变的结果,与细胞周期失控密切相关。而细胞周期的顺利进行和完成又依赖于一系列正负调节因子的相互作用,主要有细胞周期蛋白(Cyclins)、细胞周期蛋白依赖性激酶和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白。细胞周期素D1是G1/S转换的正性调控因子,细胞周期素B1在G2/M期转变中起关键作用。近年的研究发现Cyclin D1及CyclinB1在多种实体瘤中有过表达现象,而且与恶性肿瘤的增殖、分化、转移和复发等密切相关[1,2]。
肿瘤是一类细胞周期调控异常引起细胞过度增殖所致的疾病。细胞周期调控异常与细胞癌变密切相关,CyclinD1是细胞周期蛋白家族中的重要一员,它与细胞周期蛋白依赖性激酶结合后,使细胞分裂由G1期进入s期。当CyclinD1扩增或过表达时,G1/S期缩短,促使细胞增殖,导致癌变。现在已经发现,在乳腺癌、肝癌等实体瘤中CyclinD1基因扩增,其蛋白产物过度表达。Kawakubo等报道Cyclin D1 在食管鳞癌组织中的阳性表达率为80%,Langer等报道为77%,本研究中Cyclin D1在食管鳞癌组织中的阳性表达率为61.6%,与之接近。有报道,抑制Cyclin D1表达,可阻滞肿瘤细胞由G1进入S期[3]。Cyclin D1不但与肿瘤的发生、发展有关,而且与肿瘤的转移、预后也密切相关。在多种肿瘤中均发现cyclinD1蛋白过表达者的生存率明显低于低表达者,提示其可作为有效预后因子。本研究显示,有淋巴结转移组的Cyclin D1的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0.01);低分化组阳性表达率明显高于高分化组(P<0.01),提示与肿瘤细胞的生物学行为有关。
Cyclin B1促进了G2/M期的进展和有丝分裂的完成。目前的研究表明,Cyclin B1在许多人类恶性肿瘤中过度表达。本研究中Cyclin B1在食管鳞癌组织中的阳性表达率为69.8%,明显高于正常组织中3.7%的表达率(P<0.01)。Cyclin B1的过度表达与肿瘤的恶性行为有关, Yoshidaet al在对非小细胞肺癌的研究中发现,CyclinB1的过表达与非小细胞肺癌分化级别和血管侵袭有关,Cyclin B1的过表达,恶性潜力增加,是非小细胞肺癌患者的有意义的预后指标。Kushneret报道了头颈部鳞状细胞癌患者中有CyclinB1过表达的比无Cyclin B1过表达的有更高的临床分期。本研究结果显示,Cyclin B1的表达低分化组阳性率明显高于高分化组(P<0.01),分化程度愈低,Cyclin B1的表达阳性率越高;而且食管鳞癌的浸润浅层的表达率低于浸润深层的表达率,有淋巴结转移组的Cyclin B1的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0.01)。这表明Cyclin B1的高表达预示食管鳞癌有较高的侵袭性且预后不良,因此,检测CyclinB1表达对判定食管鳞癌的预后有一定的价值。
参考文献
1Sherr CJ,Roberts JM.Inhibitors of mammalian G1 cyclin-dependent kinase.Genes Dev,1995,9(10):145-149.
2Kim DH.Prognostic implications of cyclin B1,p34cdc2,p27(Kip1) and p53 expression in gastric cancer.Yonsei Med J,2007,48:694-700.
3朱艳琴,王凯娟.苦参素注射液对Eca-109细胞周期及CycinD1、CDK4蛋白表达的影响.郑州大学学报(医学版),2008,43(6):1082-1085.