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摘要：以基础饲料中添加5%、10%、15%、20%羽毛肽粉的配合膨化饲料饲养瓦氏黄颡鱼Pelteobagrusvachelli稚鱼60 d，研究其肌肉营养成分的变化规律。结果显示，羽毛肽粉添加水平在20%范围内时，瓦氏黄颡鱼肌肉常规营养成分（蛋白质、灰分、脂肪、水分）无显著性变化（P>0.05）。10%羽毛肽粉添加组黄颡鱼肌肉必需氨基酸、非必需氨基酸、儿童必需氨基酸、氨基酸总量和呈味氨基酸含量均显著高于其他添加组（P<0.05），与对照组无显著性差异（P>0.05）。饲料中添加10%羽毛肽粉黄颡鱼肌肉的E/T、E/N均显著低于对照组及其他添加组（P<0.05）。羽毛肽粉添加水平达到10%时，瓦氏黄颡鱼肌肉的Lys比值、EAAI值、AAS和cS评分值均最高，而接近于对照组。当饲料中添加10%羽毛肽粉时，瓦氏黄颡鱼肌肉棕榈酸的相对含量显著低于其他添加组与对照组（P<0.05）。当羽毛肽粉添加水平在15%范围内时，瓦氏黄颡鱼肌肉的SFA含量和顺式油酸的相对含量随着添加比例的升高而显著下降（P<0.05）。当饲料中添加10%羽毛肽粉时，瓦氏黄颡鱼肌肉的DHA+EPA、HuFA、PUFA和（w3）PUFA含量显著高于其他添加组与对照组（P<0.05）。可见，在瓦氏黄颡鱼饲料中适量添加羽毛肽粉，可以显著提高瓦氏黄颡鱼肌肉营养价值。
关键词：瓦氏黄颡鱼；稚鱼；羽毛肽粉；营养成分
中图分类号：S963 文献标识码：A 文章编号：1008-0384（2017）02-111-08
瓦氏黄颡鱼Pelteobagrus vachelli属鲇形目，鳞科，黄颡鱼属，俗称江黄颡、嘎牙子等，广布于我国东部各太平洋水系，是小型名优淡水鱼类，具有高蛋白质、低脂肪的营养特点，味道鲜美、肉质细嫩、无肌间刺，深受消费者喜爱，具有较高的经济价值。
近年来，随着水产养殖规模日益扩大及海洋捕捞渐达峰值，饲料主要蛋白质源鱼粉价格不断上扬，寻找水产饲料替代蛋白质源、降低养殖成本已成为水生动物营养研究的热点之一，研究种类包括豆粕、棉籽粕、玉米蛋白粉、花生粕、菜籽粕等，研究对象涉及鱼类、虾类、贝类，如草鱼Ctenopharyngodonidellus、真鲷Pagrosomus major、罗非鱼Tilapianilotica、凡纳滨白对虾Litopenaeusvannamei、中华绒螯蟹、方斑东风螺等。我国畜禽养殖业发达，羽毛粉资源丰富、蛋白质含量高、价格便宜，是潜在的饲料蛋白质源。前期研究表明，当饲料中添加羽毛粉时，会由于其消化率低、适口性差而影响水生动物的生长。项目组前期通过对羽毛粉进行预处理，获得了具自主知识产权的羽毛肽粉，具有良好的消化吸收率及适口性，并在鳗鲡饲料中得到应用。
目前关于瓦氏黄颡鱼营养需求的研究已有一些报道，而有关羽毛肽粉在瓦氏黄颡鱼配合饲料中的应用尚不多见。本试验通过在配合饲料中添加羽毛肽粉饲喂瓦氏黄颡鱼幼鱼，研究不同羽毛肽粉添加水平对瓦氏黄颡鱼幼鱼肌肉营养成分（生化成分、氨基酸组成和脂肪酸组成）的影响，并对其营养价值进行评价，旨在探讨羽毛肽粉作为瓦氏黄颡鱼配合饲料蛋白质源时的适宜添加量，以期降低瓦氏黄颡鱼养殖饲料成本，并为羽毛肽粉在其他水产动物配合饲料中的应用提供参考。
1材料与方法
1.1试验设计
试验用鱼体重（25±2）g，外观正常、体格均匀健壮。试验共设5个处理，每个处理3个重复，每个重复30尾试验鱼，分别置于循环水系统中。试验期间，水温控制在26～28℃，pH 7.8～8.0。每日分别于8：00和18：00投喂2次试验饲料，1h后观察，用虹吸器吸底，清除残饵及死苗，称重记录。养殖周期60 d。
根据DB35/T 1054-2010黄颡鱼配合饲料要求，等氮等能配制黄颡鱼基础饲料，各组羽毛肽粉添加量依次为5%、10%、15%、20%，试验饲料营养成分见表1，氨基酸组成见表2。根据GB/T6435-2014、GB/T 6438-2007、GB"T6432-1994、GB/T6433-2006、GB/T 18246-2000依次測定饲料水分、粗灰分、粗蛋白、粗脂肪和氨基酸。
1.2样品处理
试验结束后，停食24 h后取样。随机抽取每个群体各15尾，设置3个平行组，沿着脊椎骨将两边鱼肉取下，取每尾鱼肌肉10 g左右，混合作为样品，用组织捣碎机捣碎后，待测。
1.3检测方法
使用l（jeltec 2300型全自动凯氏定氮仪，按照GB/T 5009.5-2010凯氏定氮法测定粗蛋白质；按照GB/T 5009.6-2003索氏（无水乙醚）提取法测定粗脂肪；按照GB/T 5009.4-2010马弗炉（550～C）灰化法测定粗灰分；使用日立L-8800型氨基酸自动分析仪，按照GB/T 5009.124-2003盐酸水解法、GB/T 15399-1994氧化酸解法和GB/T18246-2000（7.1.2）氢氧化锂水解法测定氨基酸；使用岛津GC20LO气相色谱仪，按照GB/T 17376-2008制备脂肪酸甲酯、GB/T 17377-2008气相色谱法测定和峰面积归一化法计算脂肪酸。
1.4营养评价法
氨基酸支/芳值（F）按以下公式计算：
F/（mg·g-1）=[（异亮氨酸+亮氨酸+缬草氨酸）/（苯丙氨酸+酪氨酸+色氨酸）]
根据1973年WHO/FAO建议的每克氮氨基酸评分标准模式和鸡蛋蛋白评分标准模式分别按以下公式计算氨基酸评分（AAS）、化学评分（CS）和必需氨基酸指数（EAAI）。
ASS=[（待测蛋白质中某一必需氨基酸（mg·g-1 N）]/[Egg蛋白模式中相应必需氨基酸（mg·g-1N）]
CS=[待测蛋白质中某一必需氨基酸的相对含量（与必需氨基酸总量之比）]/[Egg蛋白模式中相应必需氨基酸（与必需氨基酸总量之比）]
式中：mg·g-1N为每克氮中氨基酸的毫克数（肌肉氨基酸含量×62.5/肌肉蛋白质的百分含量）；p为待测蛋白；s为鸡蛋蛋白。
1.5数据处理与分析
试验结果用Excel和SPSS 17.0软件进行统计分析，结果以平均值±标准差表示。
2结果与分析
2.1羽毛肽粉对瓦氏黄颡鱼肌肉生化成分的影响
从表3可知，饲料中添加羽毛肽粉对黄颡鱼肌肉水分、脂肪、灰分、蛋白含量均无显著影响（P>0.05）。
国内外就蛋白质源对水生动物体成分影响研究结论不尽相同，不同蛋白质源及其添加水平对不同营养指标影响各异。伍代勇等发现，棉籽粕添加水平对南美白对虾肌肉成分无显著性影响。陈亮的研究表明，棉籽粕添加水平对中华绒螯蟹幼蟹全蟹水分含量无显著影响，而对照组灰分含量显著低于66%棉籽粕添加组，蛋白质含量显著高于66%棉籽粕添加组。Yue等和El-Saidy等研究均表明，棉籽粕添加水平对尼罗罗非鱼肌肉成分无显著影响。本试验结果表明，当羽毛肽粉添加水平在20%范围内时，对瓦氏黄颡鱼肌肉生化成分无显著性影响（P>0.05）。但蛋白质源对水生动物体成分的影响机理尚未明确，有待进一步深入研究。
2.2羽毛肽粉对瓦氏黄颡鱼肌肉氨基酸组成的影响
2.2.1氨基酸的种类及含量 从表4可知，饲料中添加羽毛肽粉对黄颡鱼肌肉的酪氨酸、组氨酸、精氨酸、谷氨酸含量均无显著影响（P>0.05）。饲料中添加5%的羽毛肽粉对黄颡鱼肌肉的氨基酸含量无显著影响（P>0.05）；除赖氨酸和蛋氨酸外，饲料中添加10%的羽毛肽粉对黄颡鱼肌肉的其他氨基酸含量与对照组间均无显著性差异（P>0.05）；当饲料中添加羽毛肽粉的比例达到15%，黄颡鱼肌肉的大部分氨基酸含量与对照组间有显著性差异（P<0.05）；当饲料中添加羽毛肽粉的比例达到20%，黄颡鱼肌肉的氨基酸含量与对照组间有显著性差异（P<0.05）。饲料中添加10%羽毛肽粉的黄颡鱼肌肉的必需氨基酸、非必需氨基酸、儿童必需氨基酸和氨基酸总量均高于其他添加组，而接近于对照组。
食品味道鮮美的程度主要由其蛋白质中呈味氨基酸（包括Asp、Glu、Arg、Ala和Gly）的组成和含量所决定。从表4可知，当饲料中添加羽毛肽粉的比例达到10%，黄颡鱼肌肉的呈味氨基酸含量显著高于其他羽毛肽粉添加组（P<0.05），而与对照组无差异（P>0.05）；呈味氨基酸/氨基酸总量（EFAA/TAA）的比值显著高于对照组及其他添加组（P<0.05）。
国内外就饲料蛋白质对水生动物体蛋白质氨基酸的影响研究一致认为：饲料不同种类的氨基酸与鱼体氨基酸组成和需求越接近，鱼类利用饲料氨基酸的效率就越高，也越有利于鱼体的生长。青木隆子研究表明，同品种动物体组织氨基酸含量主要受采食饵料的粗蛋白及氨基酸含量影响。叶元土等研究表明，平衡的氨基酸对草鱼的养殖效果呈正相关关系，使草鱼获得较快的速度生长，且鱼体品质保持良好。本试验结果表明，当羽毛肽粉添加水平在10%范围内时，对瓦氏黄颡鱼肌肉的蛋白质氨基酸含量无显著性影响（P>0.05）；饲料中添加10%羽毛肽粉的黄颡鱼肌肉的氨基酸指标均高于其他添加组，而接近于对照组。对于瓦氏黄颡鱼在不同的生长阶段、不同的饲养环境以及饲料平衡条件下羽毛肽粉的添加比例有待进一步深入研究。
2.2.2氨基酸营养价值评价 从表5可知，饲料中添加羽毛肽粉对黄颡鱼肌肉的F值无显著影响（P>0.05）。其中，饲料中添加10%羽毛肽粉黄颡鱼的F值最高。正常人及哺乳动物的支/芳值为3.0～3.5，当肝受损伤时，则降为1.0～1.5。
从表5可知，饲料中添加10%羽毛肽粉黄颡鱼肌肉的E/T、E/N均显著低于对照组及其他饲料添加组（P<0.05）。营养价值较高食物的蛋白质不仅所含EAA种类要齐全，而且EAA之间的比例也要适宜，最好能与人体需要相符合，有利于EAA吸收，营养价值最高。根据FAO/WHO模式，饲料中添加10%羽毛肽粉黄颡鱼肌肉蛋白质氨基酸不仅种类组成合理，而且具有较高的营养价值。
从表6可知，在羽毛肽粉添加水平在20%范围内，瓦氏黄颡鱼肌肉AAS和CS评分的第一限制性氨基酸均为Trp；Lys含量远远超过鸡蛋蛋白模式中相应含量，都达到1.3倍以上；EAAI值均大于80%。可见，在羽毛肽粉添加水平在20%范围内，瓦氏黄颡鱼对于以谷物为主的膳食者来说，可以弥补谷物食品中赖氨酸的不足，从而提高人体对蛋白质的利用率；其肌肉的必需氨基酸组成相对比较平衡，且含量十分丰富，是营养价值很高的动物蛋白源。而羽毛肽粉添加水平达到10%时，瓦氏黄颡鱼肌肉的Lys比值、EAAI值、AAS和CS评分值均最高，而接近于对照组。
2.3羽毛肽粉对瓦氏黄颡鱼体脂肪酸组成的影响
从表7可知，饲料中添加羽毛肽粉对黄颡鱼肌肉的单个脂肪酸相对含量、SFA、MUFA、PUFA、HUFA和EFA的含量均有显著影响（P<0.05）。
在羽毛肽粉添加水平在20%范围内，瓦氏黄颡鱼肌肉相对含量最高的SFA均为棕榈酸。研究发现，棕榈酸可引起血脂升高，并可能导致血液中的胆固醇含量增加。本试验结果表明，当饲料中添加10%羽毛肽粉时，瓦氏黄颡鱼肌肉棕榈酸的相对含量显著低于其他添加组与对照组（P<0.05）；当羽毛肽粉添加水平在15%范围内时，瓦氏黄颡鱼肌肉的SFA含量随着添加比例的升高而显著下降。
在羽毛肽粉添加水平在20%范围内，瓦氏黄颡鱼肌肉相对含量最高的MUFA均为顺式油酸。研究认为，MUFA膳食能降低低密度脂蛋白胆固醇和血清总胆固醇，同时没有引起高密度脂蛋白胆固醇下降。顺式油酸为低血脂性的脂肪酸，有降低胆固醇和低密度脂蛋白的作用而被认为是一种良性的脂肪酸E333。本试验结果表明，当羽毛肽粉添加水平在15%范围内时，瓦氏黄颡鱼肌肉顺式油酸的相对含量随着添加比例的升高而显著下降（P<0.05）。
瓦氏黄颡鱼肌肉的PUFA含有DHA、EPA和EFA（顺式亚油酸+亚麻酸）。邴旭文等研究发现，PUFA具有明显地降血脂、抑制血小板凝集、降血压、提高生物膜液态性、抗肿瘤和免疫调节作用，能显著降低心血管疾病的发病率，其中其主要作用的是DHA和EPA。EPA和DHA具有健脑预防老年痴呆、防治癌症、保护视力、减少脂肪在血管壁的沉积以及提高血管的韧性等功能。Sundstrom等研究发现，肥胖指数与SFA和MUFA的摄入呈正相关，而与PUFA的摄入呈负相关，而肥胖儿童多是n-3脂肪酸摄入不足。本试验结果表明，当饲料中添加10%羽毛肽粉时，瓦氏黄颡鱼肌肉的DHA+EPA、HUFA、PUFA和（n-3）PUFA含量显著高于其他添加组与对照组（P<0.05）。
3结论
饲料中添加10%的羽毛肽粉，可以显著提高瓦氏黄颡鱼肌肉的FAA、FAA/TAA的比值、EAA、TAA、Lys比值、EAAI值、AAS评分值、CS评分值、DHA+EPA、HUFA、PUFA和（n-3）PUFA含量。羽毛肽粉添加水平在15%范围内时，瓦氏黄颡鱼肌肉的顺式油酸和SFA含量随着添加比例的升高而显著下降。
（责任编辑：柯文辉）